ZUSAMMENFASSUNG UND ERKLÄRUNG DER TEST
Viszerale Leishmaniose oder Kala-Azar ist eine verbreitete Infektion, die durch mehrere Unterarten des L. donovani verursacht wird.Schätzungen der Weltgesundheitsorganisation (WHO) zufolge sind etwa 12 Millionen Menschen in 88 Ländern von der Krankheit betroffen.Es wird durch Stiche der Phlebotomus-Sandmücken auf den Menschen übertragen, die sich durch die Fütterung infizierter Tiere infizieren.Obwohl es sich um eine Krankheit handelt, die in armen Ländern auftritt, ist sie in Südeuropa zur führenden opportunistischen Infektion bei AIDS-Patienten geworden.Die Identifizierung des L. donovani-Organismus aus dem Blut, Knochenmark, der Leber, den Lymphknoten oder der Milz liefert ein eindeutiges Mittel zur Diagnose.Serologischer Nachweis von Anti-L.donovani IgM erweist sich als hervorragender Marker für die akute viszerale Leishmaniose.In der Klinik verwendete Tests umfassen ELISA, fluoreszierende Antikörper oder direkte Agglutinationstests 4-5.Kürzlich hat die Verwendung von L. donovani-spezifischem Protein in dem Test die Sensitivität und Spezifität dramatisch verbessert.
Der Leishmania IgG/IgM Combo Schnelltest ist ein rekombinanter proteinbasierter serologischer Test, der IgG- und IgM-Antikörper gegen L. Donovani gleichzeitig nachweist.Der Test liefert ohne Instrumente innerhalb von 15 Minuten ein zuverlässiges Ergebnis.
PRINZIP
Der Leishmania IgG/IgM-Schnelltest ist ein chromatographischer Lateral-Flow-Immunoassay.Die Testkassette besteht aus: 1) einem weinroten Konjugat-Pad mit rekombinantem L. donovani-Antigen, konjugiert mit kolloidalem Gold (Leishmania-Konjugate) und Kaninchen-IgG-Gold-Konjugaten, 2) einem Nitrozellulose-Membranstreifen mit zwei Testbanden (T1- und T2-Banden) und ein Kontrollband (C-Band).Die T1-Bande ist mit monoklonalem Anti-Human-IgM zum Nachweis von Anti-L vorbeschichtet.donovani IgM, T2-Band ist mit Reagenzien zum Nachweis von Anti-L vorbeschichtet.donovani-IgG, und das C-Band ist mit Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG vorbeschichtet.
Wenn ein angemessenes Volumen der Testprobe in die Probenvertiefung der Kassette gegeben wird, wandert die Probe durch Kapillarwirkung durch die Kassette.Das L. donovani-IgM, falls in der Probe vorhanden, bindet an die Leishmania-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann durch den vorbeschichteten Anti-Human-IgM-Antikörper auf der Membran eingefangen und bildet eine weinrote T1-Bande, die ein positives L. donovani-IgM-Testergebnis anzeigt.Das L. donovani-IgG, falls in der Probe vorhanden, bindet an die Leishmania-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von den vorbeschichteten Reagenzien auf der Membran eingefangen und bildet eine weinrote T2-Bande, die ein positives L. donovani IgG-Testergebnis anzeigt.
Das Fehlen jeglicher T-Banden (T1 und T2) weist auf ein negatives Ergebnis hin.Der Test enthält eine interne Kontrolle (C-Bande), die eine weinrote Bande des Immunkomplexes aus Ziege-anti-Kaninchen-IgG/Kaninchen-IgG-Gold-Konjugat aufweisen sollte, unabhängig von der Farbentwicklung auf einer der T-Banden.Andernfalls ist das Testergebnis ungültig und die Probe muss mit einem anderen Gerät erneut getestet werden.
