ZUSAMMENFASSUNG UND ERKLÄRUNG DER TEST
Dengue-Viren, eine Familie von vier unterschiedlichen Virenserotypen (Den 1,2,3,4), sind einsträngige, umhüllte Positiv-Sense-RNA-Viren.Die Viren werden von Moskitos der tagsüber stechenden Stegemyia-Familie, hauptsächlich Aedes aegypti und Aedes albopictus, übertragen.Heute sind mehr als 2,5 Milliarden Menschen, die in den Gebieten des tropischen Asiens, Afrikas, Australiens und Amerikas leben, dem Risiko einer Dengue-Infektion ausgesetzt.Schätzungsweise 100 Millionen Fälle von Dengue-Fieber und 250.000 Fälle von lebensbedrohlichem hämorrhagischem Dengue-Fieber treten jährlich weltweit auf1-3.
Der serologische Nachweis von IgM-Antikörpern ist die häufigste Methode zur Diagnose einer Dengue-Virus-Infektion.Kürzlich zeigte der Nachweis von Antigenen, die während der Virusreplikation in dem infizierten Patienten freigesetzt wurden, sehr vielversprechende Ergebnisse.Er ermöglicht die Diagnose ab dem ersten Tag nach Beginn des Fiebers bis zum 9. Tag nach Abschluss der klinischen Phase der Erkrankung und ermöglicht so eine frühzeitige und zeitnahe Behandlung4-. Der Dengue-IgG/IgM-Schnelltest wurde entwickelt, um zirkulierendes Dengue-Antigen nachzuweisen in Serum, Plasma oder Vollblut.Der Test kann von ungeschultem oder minimal qualifiziertem Personal ohne Laborausrüstung durchgeführt werden.
PRINZIP
Der Dengue-IgG/IgM-Schnelltest ist ein chromatographischer Lateral-Flow-Immunoassay.Die Testkassette besteht aus: 1) einem weinroten Konjugat-Pad, das rekombinante Dengue-Hüllantigene enthält, die mit kolloidalem Gold (Dengue-Konjugaten) und Kaninchen-IgG-Gold-Konjugaten konjugiert sind, 2) einem Nitrozellulose-Membranstreifen mit zwei Testbanden (G- und M-Banden) und ein Kontrollband (C-Band).Die G-Bande ist mit dem Antikörper zum Nachweis von IgG-Anti-Dengue-Virus vorbeschichtet, die M-Bande ist mit Antikörpern zum Nachweis von IgM-Anti-Dengue-Virus vorbeschichtet und die C-Bande ist mit Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG vorbeschichtet.
Wenn ein ausreichendes Volumen der Testprobe in die Probenvertiefung der Testkassette gegeben wird, wandert die Probe durch Kapillarwirkung durch die Kassette.IgG-Anti-Dengue-Virus, falls in der Probe vorhanden, bindet an die Dengue-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von dem auf der G-Bande aufgebrachten Reagenz eingefangen und bildet eine burgunderfarbene G-Bande, die ein positives Dengue-Virus-IgG-Testergebnis anzeigt und auf eine kürzlich erfolgte oder wiederholte Infektion hindeutet.IgM-Anti-Dengue-Virus, falls in der Probe vorhanden, bindet an die Dengue-Konjugate.Der Immunkomplex wird dann von dem auf der M-Bande vorbeschichteten Reagenz eingefangen und bildet eine weinrote M-Bande, die ein positives Dengue-Virus-IgM-Testergebnis anzeigt und auf eine frische Infektion hindeutet.
Das Fehlen jeglicher Testbanden (G und M) weist auf ein negatives Ergebnis hin. Der Test enthält eine interne Kontrolle (C-Bande), die unabhängig von der Farbe eine weinrote Bande des Immunkomplexes aus Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG/Kaninchen-IgG-Gold-Konjugat aufweisen sollte Entwicklung auf einem der T-Bänder.Andernfalls ist das Testergebnis ungültig und die Probe muss mit einem anderen Gerät erneut getestet werden.
